Jaká je délka signálu fluorescence?

U fluorescence obvykle máme jasný (světlý) signál na temném pozadí. Toho je dosaženo použitím dvou filtrů, které nám oddělí na základě vlnových délek excitační a emisní záření (viz vedlejší obrázek). Excitační filtr vymezuje rozsah vlnových délek použitých pro excitaci.

Jak jsou fluorescenční látky ovlivňovány?

Absorbční a emisní spektrum fluorescenční látky jsou také ovlivňovány podmínkami prostředí, jako je pH, koncentrace některých iontů, nebo konjugace s jinými molekulami. Fluorescenční mikroskopie je v současné době široce rozšířený přístup jak v rostlinné tak živočišné histologii a buněčné biologii.

Jaký je emisní filtr fluorochromu?

Excitační filtr vymezuje část spektra použitou pro excitaci daného fluorochromu. Naopak část spektra emitovanou fluorochromem vymezuje emisní filtr, který buď určuje pouze spodí limit propouštěných vlnových délek, nebo orčuje obě hranice části spektra.

Proč jsou fluorochromy konjugované do sondy?

Často jsou konjugované do komplexu fluorescenční sondy s dalšími složkami, např. krátkými řetězci nukleových kyselin nebo protilátkami, které specifikují jejich interakci s cílovými molekulami a strukturami. Chemickou strukturou jsou fluorochromy obvykle organické látky s aromatickými kruhy a delokalizovanými elektrony schopnými excitace.